Ujian Pantas Adenovirus-Rembesan Hidung

Digunakan:

Kit Ujian Asid Nukleik SARS-CoV-2 digunakan untuk pengesanan kualitatif asid nukleik COVID-19 dalam swab nasofaring, swab orofarinks dan kahak. Keputusan ujian menyediakan asas diagnosis molekul untuk jangkitan atau pesakit yang disyaki, dan tidak boleh digunakan sebagai satu-satunya kriteria untuk diagnosis klinikal.

bahan:

Prosedur Ujian:

A. Penyediaan Sampel

RNA yang diekstrak ialah bahan permulaan untuk kit Ujian Asid Nukleik SARS-CoV-2.

Penting: Setiap prosedur pengekstrakan asid nukleik mesti dilakukan serentak dengan satu kawalan Positif(40 μL, cairkan dengan larutan garam steril/PBS kepada isipadu yang dikehendaki) dan satu kawalan Negatif(40 μL, cairkan dengan larutan garam steril/PBS kepada isipadu yang dikehendaki).

Adalah disyorkan untuk menggunakan kit pengekstrakan asid nukleik komersial berikut: Kit Mini RNA/DNA Viral PureLinkTM (Invitrogen); Kit Mini RNA virus (QIAGEN); Kit Hi-DNA/RNA TIANamp (TIANGEN);

B. Persediaan Campuran Tindak balas

1. Semua reagen dan sampel hendaklah dicairkan sepenuhnya, dicampur sepenuhnya dan disentrifugasi sebentar pada suhu bilik (julat anggaran 18 hingga 25 darjah ) sebelum digunakan.

2. Sediakan isipadu Campuran Tindakbalas yang diperlukan dalam tiub mikrosentrifuge polipropilena bersaiz sesuai.

3. Pipet 25 µL Campuran Tindak Balas ke dalam setiap telaga yang diperlukan daripada plat tindak balas telaga optik 96-telaga yang sesuai atau tiub tindak balas optik yang sesuai.

C. Penambahan templat

1. Tambah 5 μL RNA yang diekstrak daripada Sampel/Kawalan positif/Kawalan negatif. Jumlah isipadu ialah 30 μL.

2. Campurkan sampel dan kawalan dengan teliti dengan Campuran Reaksi dengan mepipet ke atas dan ke bawah/Vortex.

3. Tutup 96-plat tindak balas perigi dengan penutup yang sesuai atau filem pelekat optik dan tiub tindak balas dengan penutup yang sesuai.

4. Sentrifuge 96-plat tindak balas telaga dalam emparan dengan pemutar plat mikrotiter selama 30 saat pada kira-kira 2500rpm.

D. Memprogramkan Instrumen PCR Masa Nyata

Untuk maklumat asas mengenai persediaan dan pengaturcaraan instrumen PCR masa nyata yang berbeza, sila rujuk manual pengguna instrumen masing-masing. Ujian telah dioptimumkan untuk sistem PCR Masa Nyata ABI7500. Larian PCR dilakukan dengan keadaan berbasikal seperti yang diterangkan dalam jadual di bawah.

Tentukan pengesan pendarfluor

*Sila tetapkan rujukan dalaman pendarfluor instrumen kepada "Tiada", contohnya: Untuk instrumen siri ABI tetapkan "Rujukan Pasif" kepada "Tiada".

E. Analisis data

Sila tetapkan parameter analisis dan analisis data mengikut arahan pengendalian instrumen yang berkaitan.

Ambil ABI 7500 sebagai contoh:

Garis Dasar hendaklah ditetapkan kepada julat yang menghapuskan pendarfluor latar belakang yang terdapat dalam kitaran awal penguatan, tetapi yang tidak bertindih dengan kawasan di mana isyarat amplifikasi meningkat di atas latar belakang (Nilai mula:3~10; Nilai tamat: {{2} }). Ambang Kitaran (Ct) hendaklah berada dalam asas fasa eksponen. Klik "Analisis" untuk mendapatkan hasil analisis secara automatik, dan baca hasil pengesanan dalam tetingkap "Laporan".

Cool tags: adenovirus pantas ujian - hidung rembesan, China, pembekal, pengeluar, kilang, pukal